发酵罐培养重组乳酸乳球菌表达犬γ-干扰素条件研究 Optimization of the fermentation condition of expressing the γ-interferon in recombinant Lactococcus lactis

为探讨发酵罐培养重组乳酸乳球菌表达犬γ-干扰素最佳条件,研究测定重组乳酸乳球菌p AMJ399-Ca IFN-γ/PSM565静置培养时生长曲线及p H,与添加不同浓度β甘油磷酸二钠的生长曲线及p H进行比较。结果表明,β-甘油磷酸二钠作为缓冲溶液,能使培养细菌p H保持稳定,促进重组菌生长。对重组乳酸乳球菌p AMJ399-Ca IFN-γ/PSM565在发酵罐中的培养条件优化,并对不同p H条件下培养重组乳酸乳球菌OD600及重组p AMJ399-Ca IFN-γ/PSM565表达的蛋白量进行Western-blot检测。发酵结果显示,32℃培养,搅拌子转速为52r·min-1,6 h后以0.25 m L·min-1速率补充50%葡萄糖,明显提高菌群数量,p H在5.5和5.75时检测重组菌OD600值达到6.87和7.0。p H为5.5和5.75时培养诱导重组乳酸乳球菌p AMJ399-Ca IFN-γ/PSM565的蛋白表达量均比p H 6和p H 6.25时高,但与静止培养诱导结果相比,重组菌表达量增长不明显。研究可为工业化生产重组犬γ-干扰素提供技术支持。