应用高效液相色谱串联质谱法检测细胞内神经酰胺的含量

目的:采用高效液相色谱串联质谱法建立测定细胞中不同类型神经酰胺含量的分析方法.方法:采用Agilent 1290高效液相色谱仪系统,ZORBAX Eclipse XDB-C8(150.0 mm×2.1 mm,3.5 μL)色谱柱,柱温35 ℃;流动相A为含1 mmol/L甲酸铵和0.2%甲酸的甲醇溶液,流动相B为100%甲醇;流速为0.3 mL/min,梯度洗脱;质谱检测中采用电喷雾离子源多反应监测模式.结果: C16、C17、C18、C24四种神经酰胺的色谱响应线性范围良好(R2 ≥0.9989);平均回收率分别为99.1%、99.9%、100.5%、98.2%,相对标准偏差分别为5.6%、5.1%、4.8%、5.5%(n = 9).结论:采用高效液相色谱串联质谱法建立同时测定细胞中不同类型神经酰胺的方法灵敏度高,重现性好,可以作为检测细胞中不同类型神经酰胺含量的工具.