麦麸酯酶的分离纯化及酶学性质研究

为了能更好地将麦麸酯酶用于检测食品中的农药残留，采用硫酸铵分段沉淀、透析、SephadexG-200凝胶层析、超滤浓缩等方法对麦麸中提取的酯酶粗液进行了分离和纯化，并对其酶学性质进行了研究。结果表明，得到的麦麸酯酶比活力为289.14 U·mg-1，回收率为47.7%，纯化倍数为16.17。麦麸酯酶的分子量约为26.0 kDa，最大紫外吸收峰为224 nm和280 nm，最适反应温度为30 ℃，稳定范围为25～40 ℃；最适pH为8.0，pH稳定范围为4.0～8.0。Cu2+、Mg2+、Ca2+、Al3+、柠檬酸钠、四硼酸钠均对麦麸酯酶有抑制作用，而Fe2+、Mn2+、柠檬酸、硫酸铝钾对该酶有促进作用；以α-乙酸萘酯为底物的动力学参数Km和Vmax值分别为0.85 mg·mL-1和0.93 mg·mL-1·min-1。4 ℃时，麦麸酯酶半衰期为10.4 d，而25 ℃时，酯酶半衰期为8.6 d。本研究结果对麦麸酯酶的应用具有一定参考价值。