小麦HMW-GS毛细管电泳高效分离体系研究

小麦高分子量谷蛋白亚基（HMW-GS）与小麦品质密切相关。为构建高效HMW-GS分离体系，以中国春为标准样，通过HPCE(毛细管电泳）方式，在亚氨基二乙酸（Iminodiacetic acid，IDA）缓冲液基础上，系统分析了不同组分浓度、pH以及毛细管电泳参数对HMW-GS分离效果的影响。结果表明，以15% 乙腈（Acetonitrile，ACN）+75 mmol·L-1 IDA+0.05% 羟丙基甲基纤维素（Hydroxypropyl methylcellulose，HPMC）（pH=2.5）为缓冲液，采用内径25 μm、检测长度27 cm毛细管，PDA检测波长200 nm，分离电压20 kV，运行温度30 ℃，样品10.0 kV进样5 s时，亚基分离效果最好，连续多次、多天重复电泳，均可获得稳定图谱。相比传统的Phos-gly体系，图谱分辨率更好，分离重现性更高（亚基出峰时间RSD值小于0.2%）。