西农538 LMW-GS基因的克隆、原核表达及功能鉴定

为了探索普通小麦品种西农538的LMW-GS对面粉加工品质的影响，根据NCBI中已公布的LMW-GS基因序列，设计了一对特异性引物，从西农538基因组DNA中克隆出LMW-GS基因后，对其进行原核表达及掺粉试验。序列分析表明，克隆得到的LMW-GS基因序列 (GenBank登录号为KX452081)有单一完整的开放阅读框，编码区长915 bp，内含子。同源性比对及进化树分析发现，该基因属于 Glu-D3、Type V (Group 10)、m型、C组LMW-GS基因。SDS-PAGE和Western blot分析表明，该基因原核表达成功。微量掺粉试验表明，诱导表达的蛋白对小麦面粉加工品质有负效应。