田菁茎瘤固氮根瘤菌对小麦叶组织的促生作用研究

利用GFP标记的田菁茎瘤固氮根瘤菌(Azorhizobium caulinodans ORS 571)侵染露白24 h的小麦种子，分别在侵染后0、6、12、24、48、72和96 h采样，利用实时荧光定量PCR方法检测小麦体内6条与促生作用相关miRNAs（miR156、miR159、miR160、miR167、miR168和miR403）的表达模式，检测其中3条miRNAs（miR159、miR167和miR168）的靶基因表达模式；以接菌8 d 的小麦样品做切片，利用激光共聚焦显微镜检测小麦叶部田菁茎瘤固氮根瘤菌的分布，并测定小麦的生理指标。结果显示：（1）田菁茎瘤固氮根瘤菌侵染小麦后能够在叶片边缘部位定殖。（2）小麦叶片中与促生作用相关的6条miRNAs出现了不同程度变化，在12~24 h到达其峰值，随后逐渐下降，其中miR159在峰值时的表达量为初始表达量的2.88倍。（3）3条miRNAs的靶基因表达模式与相应miRNA表达模式相对应，但并不严格。（4）生理指标测定结果显示，接种田菁茎瘤固氮根瘤菌对小麦叶片产生明显的促生作用，其中叶鲜重在96 h的变化与对照差异极显著。研究表明，接种的田菁茎瘤固氮根瘤菌能够到达小麦叶组织，对小麦叶片的生长产生明显的促生作用，其中miRNAs在促生过程中发挥重要作用。