鸭儿芹羟基肉桂酸转移酶基因的克隆及其对不同温度的响应

以贵州省野生鸭儿芹为研究对象,用RT-PCR克隆获得与木质素合成有关的羟基肉桂酸转移酶基因(CjHCT),并分析CjHCT基因对不同温度的响应,探索人工栽培鸭儿芹的适宜温度。结果表明:(1)CjHCT基因开放阅读框长度为1 290 bp,编码429个氨基酸;蛋白质分子质量为47.58 kD,等电点为6.67;进化树分析表明,CjHCT与茄科植物的HCT亲缘关系最近。(2)荧光定量PCR分析显示,CjHCT基因在贵州鸭儿芹根、叶柄、叶及花不同组织中的表达具有组织特异性,且在根中CjHCT基因的表达量最高,而在叶中表达量最低,花与叶中该基因表达量相近。(3)对鸭儿芹生长过程中主要面临的4种不同温度(10 ℃、18 ℃、30 ℃和38 ℃)分别处理0、0.5、1、2、4、8、12、24 h,荧光定量PCR检测显示,CjHCT基因的表达量(以0 h处理作为对照,表达量为1)在高温(30 ℃和38 ℃)处理下于0.5 h 时最高,其中30 ℃处理的CjHCT基因表达量高于38 ℃处理;在低温(10 ℃和18 ℃)下鸭儿芹CjHCT基因表达量于12 h时最高,其中10 ℃处理0.5 h时CjHCT基因较对照表现为下调;高温(30 ℃和38 ℃)下CjHCT基因表达量峰值比低温(10 ℃和18 ℃)下表达量峰值高,而且峰值出现的时间也较早。该实验意义在于初步研究发现低温栽培鸭儿芹能抑制CjHCT基因的表达,为人工栽培鸭儿芹温度调控提供了参考。