刚毛柽柳液泡膜H+ PPase基因的克隆与胁迫下的表达分析

通过对刚毛柽柳转录组分析，鉴定获得1个液泡膜H+ PPase基因的cDNA序列,命名为ThVP1。该cDNA序列全长3 022 bp，开放阅读框为2 298 bp，编码765个氨基酸，编码蛋白相对分子质量80.37 kD，理论等电点5.25。ThVP1 编码蛋白的疏水性较强，含有13个跨膜区。氨基酸多序列比对结果显示，ThVP1具有典型的液泡膜H+ PPase 家族3个高度保守片段(CS1 、CS2 和CS3)，与大豆VP1氨基酸序列一致性最高，为93%。系统进化分析表明，ThVP1属于I型液泡膜H+ PPase基因。实时荧光定量RT PCR分析显示，NaCl和PEG胁迫下，ThVP1在柽柳根和叶中均呈现明显上调表达，表达量最高达到对照的20.9倍，暗示ThVP1可能在刚毛柽柳抗旱耐盐过程中发挥重要作用。