龙眼DlPPO1基因的克隆及其表达调控分析

该研究根据同源克隆技术，利用RT PCR和RACE技术，以‘四季蜜’龙眼叶片cDNA为模板，获得龙眼多酚氧化酶基因（polyphenol oxidase，PPO）的3个转录本DlPPO1 a、DlPPO1 b和DlPPO1 c的cDNA全长序列（KM387405、KM516087和KM516088）和1条DNA序列DlPPO1（KU837229）。DlPPO1 a、DlPPO1 b和DlPPO1 c的全长分别为1 969、1 960和1 920 bp，包含相同的完整开放阅读框1 800 bp并编码599个氨基酸；该基因与荔枝、橄榄和枣等物种的PPO基因同源性较高。生物信息学分析表明，DlPPO1保守结构域具有多酚氧化酶的典型结构域特征。利用实时荧光定量PCR技术检测DlPPO1表达结果表明，在龙眼体胚发生过程中，DlPPO1从心形胚时期开始上调表达至子叶胚时期达到最高，推测其在龙眼体胚发生中后期可能发挥重要作用；DlPPO1在龙眼叶片中表达量最高，其次是花芽，而在其他组织部位表达量较低。激素和非生物胁迫处理下的表达分析表明，水杨酸（SA）、低浓度茉莉酸甲酯（MeJA）、NaCl、甘露醇及PEG可诱导DlPPO1基因上调表达，这些表达模式暗示其可能参与多种非生物胁迫应答过程。