中国水仙NtPI2基因的克隆及遗传转化

采用RT PCR和RACE 技术，从中国水仙‘金盏银台’中获得1个MADS box 基因NtPI2。NtPI2基因全长810 bp，含有1个627 bp开放阅读框，编码208个氨基酸。系统进化树显示，NtPI2属于B类MADS box 基因家族的PI/GLO 类基因。荧光定量PCR分析表明，NtPI2基因在中国水仙‘金盏银台’各营养器官中都有表达；在单瓣和重瓣水仙花朵的各个部位均有表达，但表达模式存在差异。比较NtPI2在单瓣和重瓣中国水仙中的表达模式，发现重瓣水仙‘玉玲珑’的瓣化雄蕊和副冠的NtPI2基因表达量较单瓣水仙‘金盏银台’显著增高，推测NtPI2基因在瓣化雄蕊中表达量显著增高可能是重瓣中国水仙发生的直接原因。成功构建了NtPI2基因的pCAMBIA1302 NtPI2超表达载体，并通过农杆菌介导法进行烟草的遗传转化，分子鉴定结果表明共获得了8株转NtPI2基因植株。本研究为深入探索NtPI2基因的功能及其与中国水仙重瓣花形成的关系奠定了基础。