白三叶TrFQR1基因克隆与表达分析

采用RACE和RT PCR方法，克隆白三叶拉丁诺（Trifolium repens cv. ‘Ladino’） 的cDNA基因序列，命名为TrFQR1，对该序列进行生物信息学分析，利用实时荧光定量PCR检测TrFQR1的表达模式。结果表明：（1）TrFQR1序列长为1 003 bp，开放阅读框为612 bp，编码203个氨基酸，该蛋白的理论分子质量21.88 kD，等电点为5.96，属于亲水性稳定蛋白，信号肽，跨膜结构域，在进化上高度保守，N端11~15位氨基酸和C端112~165位氨基酸是FMN结合位点。（2）TrFQR1表达模式分析显示，白三叶TrFQR1基因对于8种处理均有响应，但不同处理响应不同，其中：用25 μmol/L SNP、10 mmol/L H2O2、5 mmol/L CaCl2处理1.5 h以及15% PEG处理3 h时，白三叶TrFQR1基因相对表达量显著增加；在200 mmol/L NaCl和600 μmol/L CdSO4处理下，TrFQR1基因相对表达量随处理时间的增加而增加；4 ℃处理6 h和0.02 mmol/L NaHS处理1.5 h时，TrFQR1基因相对表达量显著减少。