文心兰乙烯不敏感基因EIN2的克隆及表达分析

该研究采用PCR、RACE方法，对文心兰‘南茜’的乙烯不敏感蛋白基因（ethylene insensitive 2，EIN2）进行克隆及生物信息学分析，并采用qRT PCR技术，对该基因在文心兰不同组织器官和不同花期中的表达模式进行分析。结果表明：（1）成功克隆得到文心兰EIN2基因序列，命名为OnEIN2（MH497388）；该基因cDNA序列全长为4 177 bp，其中开放阅读框3 879 bp，编码1 292个氨基酸，3′非编码区长208 bp，5′非编码区长90 bp。（2）生物信息学分析显示OnEIN2是一个不稳定的疏水蛋白，含有跨膜结构，分子式为C6406H9988N1670O1897S47；蛋白质分子量142.22 kD，理论等电点5.80。多序列比对和系统进化分析表明，文心兰EIN2与铁皮石斛EIN2的相似度最高（81.98%），二者亲缘关系也最为接近。（3）实时荧光定量PCR分析发现，OnEIN2基因在根、茎、叶花中均有表达，在花中表达量最高，茎中表达量最低；而在不同花期中，盛开期表达量最高，其次是衰老期。研究表明，文心兰OnEIN2基因在开花和衰老过程中可能有重要的作用。