蒺藜苜蓿DGAT1基因的克隆和功能鉴定

该研究采用RT PCR与电子克隆的方法，从蒺藜苜蓿cDNA中克隆得到2个编码二脂酰甘油酰基转移酶（diacylglycerol acyltransferase，DGAT）的基因MtDGAT1 1和MtDGAT1 2。MtDGAT1 1长1 620 bp，编码539个氨基酸；MtDGAT1 2长1 524 bp，编码507个氨基酸。多序列比对显示,MtDGAT1 1和MtDGAT1 2编码蛋白具有典型的植物DGAT1结构域。表达分析显示,MtDGAT1 1和MtDGAT1 2在根、茎、叶、花、种子中都有表达，在种子发育中高表达,且MtDGAT1 1于种子发育的中前期高表达，而MtDGAT1 2于种子发育的中后期高表达。酵母互补实验证实,MtDGAT1 2编码蛋白具有DGAT酶活性，能够恢复H1246的TAG合成和油体形成；而MtDGAT1 1编码蛋白不能恢复H1246的TAG合成和油体形成。