雷公藤鲨烯环氧酶基因克隆与表达分析

以雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook.f.）发状根为试验材料，采用RT PCR方法，克隆得到2个雷公藤鲨烯环氧酶编码基因，命名为TwSE1（GenBank登录号MG717395）和TwSE2（GenBank登录号MG717396）。序列分析表明，TwSE1和TwSE2的开放阅读框分别为1 578 和1 584 bp，分别编码525和527个氨基酸，2条序列相似性为76.18%，但N端序列不保守。实时荧光定量PCR检测雷公藤鲨烯环氧酶在不同组织部位的表达模式，以及雷公藤发状根受茉莉酸甲酯（MeJA）诱导后基因表达的结果表明，TwSE1、TwSE2基因在雷公藤根、茎、嫩叶、老叶、花中均有表达，TwSE1在花中表达丰度最高，在根中表达丰度最低；但TwSE2在花和嫩叶中表达量最高，在老叶中表达量最低，且TwSE2在各组织部位的表达量都低于TwSE1。雷公藤发状根经MeJA诱导后，TwSE1、TwSE2基因表达量均上升，都表现为表达量先上升后下降再上升的趋势，并于诱导后3 h达到一个高水平表达，之后下降，在诱导12 h后表达量又迅速上升；在相同诱导条件下，TwSE2基因表达水平的提高小于TwSE1基因。