茶树CsNCED2基因的克隆和表达分析

该研究以铁观音茶树品种叶片为材料，通过RT PCR技术，克隆了茶树脱落酸(ABA)合成途径关键限速酶——9 顺式环氧类胡萝卜素裂解双加氧酶(9 cis epoxycarotenoid dioxygenase, NCED)基因的全长cDNA序列。该基因cDNA全长1 931 bp，包含1 821 bp完整开放阅读框，共编码606个氨基酸残基。NCBI同源分析结果表明，与葡萄VvNCED2相似性最高（78%），命名为CsNCED2（NCBI登录号：MF765770）。氨基酸序列分析显示，其具有NCED家族的FLNO2258保守结构域，以及MIAHPKxDP和HDFAITE保守结构域序列；在保守区存在4个Fe2+活性组氨酸结合位点，N 端含有叶绿体转运肽。实时荧光定量PCR分析表明，CsNCED2基因在铁观音叶、茎和花中表达量较高；白茶萎凋和乌龙茶做青均可以诱导CsNCED2基因显著上调表达；除干旱胁迫抑制CsNCED2表达外，ABA和低温胁迫均能够诱导CsNCED2基因显著上调表达。表明CsNCED2基因在茶树ABA合成代谢以及胁迫响应中发挥重要作用。