三倍体‘银中杨’叶肉原生质体制备的优化

以三倍体杨树品种‘银中杨’（Populus alba×P.berolinensis Yinzhong）无菌苗叶片为材料，对其原生质体分离及纯化条件进行研究，为进一步通过细胞融合、基因工程等进行品种改良探索新的途径。结果表明：酶的种类及浓度、渗透压、酶解时间对‘银中杨’叶肉原生质体分离效果有显著影响，适宜的分离条件为CPW+3% Cellulase RS+0.5% Macerozyme R-10+0.3% Pectinse Y-23+0.6 mol/L甘露醇+0.6 g/L MES+1 g/L BAS，酶解时间为8 h，原生质体产量和活力分别为2.13×107个/g和80.18%；‘银中杨’叶肉原生质体纯化最佳方法为上浮法蔗糖等密度离心，且蔗糖浓度为40%时原生质体产量最高（1.06×107个/g），可满足进一步的原生质体培养等技术的要求。