发状念珠藻醛酮还原酶基因NfAKR的克隆与表达

以发状念珠藻细胞为试材，采用PCR技术克隆了醛酮还原酶基因的开放阅读框（ORF）序列，命名为NfAKR。对基因序列特征进行了生物信息学分析，根据其编码氨基酸序列预测了NfAKR蛋白的三维结构，同时探讨了PEG 6000胁迫下NfAKR的表达特性。结果表明：NfAKR基因的编码序列长912 bp，编码304个氨基酸，预测其编码蛋白的相对分子量为33.51 kD，理论等电点为4.94 ，具有醛酮还原酶超家族保守结构域。NfAKR蛋白主要由10个α 螺旋和11 β 折叠组成，中间形成一个疏水穴，作为酶的催化活性中心。NfAKR与点形念珠藻处在同一进化枝上，具有较近的亲缘关系。qRT PCR分析显示，PEG 6000胁迫下NfAKR基因上调表达，当PEG 6000浓度为8%时，其相对表达量为5.66并达到峰值。依据NfAKR基因响应干旱胁迫上调表达的特性，推测醛酮还原酶可能参与发状念珠藻抵御干旱胁迫过程。