苦荞糖基转移酶基因的克隆及活性鉴定

糖基化修饰在调控各种小分子的溶解度、稳定性及生物活性中具有重要的作用。该研究基于苦荞转录组数据，克隆获得2条糖基转移酶基因（FtUFGT4和FtUFGT5），并对其在大肠杆菌中的表达产物进行酶催活性鉴定。结果表明：（1）获得的苦荞糖基转移酶基因cDNA分别为1 434和1 470 bp，其编码蛋白同属于拟南芥糖基转移酶E类群，可能参与黄酮类化合物的糖基化。（2）多重序列比对表明，FtUFGT4和FtUFGT5蛋白C端都具有PSPG框，其催化活性位点分别是H17和H16；FtUFGT4和FtUFGT5都是典型的植物糖基转移酶GT B结构，二者的蛋白模型能与矢车菊素和UDP进行分子对接。（3）FtUFGT4和FtUFGT5在大肠杆菌中获得了可溶性表达，薄层层析实验表明二者均具有催化矢车菊素糖基化为矢车菊素 3 O 葡萄糖苷的活性。