蕨麻愈伤组织原生质体制备条件的优化

以青海‘蕨麻4号’诱导培养的愈伤组织为材料，采用4因素3水平L9(34)正交实验，研究酶类组合、酶解时间、甘露醇浓度及离心速度等主要因素对蕨麻原生质体分离的影响，建立高效、稳定的蕨麻原生质体分离体系，为进一步通过原生质体融合、基因工程等方法对蕨麻进行品种改良奠定基础。结果表明：各因素对蕨麻原生质体产量的影响顺序为：酶类组合＞酶解时间＞甘露醇浓度＞离心速度；青海‘蕨麻4号’愈伤组织原生质体的最适酶解条件为：2.0%纤维素酶+0.75% 果胶酶，40 r/min振荡酶解10 h，甘露醇浓度为0.5 mol/L，离心转速为1 000 r/min时原生质体的产量达最大（8.96×105 cells/g）,活力为92.77%。