吸水链霉菌tetr基因的克隆与表达

？根据吸水链霉菌“应城变种10-22”的一个文库质粒phz1392的测序结果设计了1对引物,聚合酶链反应扩增编码tetr的663bp基因,利用t载体和蓝白斑筛选构建了克隆质粒t-tetr,经序列测定确认扩增序列正确后克隆至pet24a,构建了表达质粒pet24a-tetr,再经序列测定确认未发生移码后转化表达宿主菌e.colidl21(de3),iptg诱导后的sds-page分析显示蛋白表达获得成功,并进一步利用ni-nta树脂纯化了tetr蛋白。