猪ghrelin基因真核表达重组质粒的构建及免疫小鼠试验

？从猪胃组织中提取总rna,采用反转录-聚合酶链反应(rt-pcr)技术,经扩增得到450bpghrelin基因。将其克隆到pmd18-t中,经双酶切初步鉴定后,将酶切下的目的基因进一步克隆到真核表达载体pci中,经pcr、酶切及序列鉴定,证实插入载体pci中的片段为含有目的基因的核苷酸序列,真核表达重组质粒pci-ghrelin-28aa构建成功;以构建的pci-ghrelin-28aa质粒肌肉注射(1mg/kg)昆明小鼠(体重18~20g),观察其体重变化。结果表明:注射该基因质粒5d后,实验组小鼠平均日增重高于对照组,且差异显著(p<0.05),尤其是注射10~15d增重最为明显。本试验构建的pci-ghrelin-28aa基因质粒对小鼠具有明显的促生长作用,并将成为新的促猪生长的基因药物。