发根农杆菌诱导人参产生发根及离体发根中人参皂甙含量的测定

？发根农杆菌a4菌株诱导人参(panaxginsengc.a.meyer)产生发根,诱导率31.6%。转化发根可在无任何激素的ms培养基上快速生长,且具有分枝性强、丛生、无向地性等特点。通过对液体培养条件的选择,发现人参发根在1/2ms液体培养基上(25℃、110r/min摇床上暗培养)获得最大生长速率,经14d培养,人参发根鲜重增加了7.97倍。利用高效液相色谱法测定发根中人参皂甙含量发现,发根系r9923中人参单体皂甙rb1含量达到10.38mg/g,超过栽培六年生人参根中rb1含量(6.45mg/g)。用高压纸电泳方法在人参发根中检测到农杆碱及甘露碱的存在。southern点杂交证明:本研究获得的人参发根确已被a4菌株ri质粒的t-dna所转化,并被整合到人参发根dna上。