应用intein融合的鸡il-2蛋白制备多克隆抗体

？研究intein？标签与目的蛋白chil-2？融合作为抗原，进行高效价兔抗chil-2蛋白多克隆抗体的制备，将去除去了n-端信号肽的chil-2基因（366bp）克隆连接到ptyb1原核表达载体，将chil-2基因与1362bp的intein基因融合在同1开放阅读框内，编码分子量约为71ku的chil-2-intein融合蛋白。诱导表达chil-2-intein融合蛋白，应用chitin-sepharose亲和层析进行融合蛋白纯化。用纯化的chil-2-intein融合蛋白免疫大白兔制备多克隆抗体。应用昆虫细胞表达系统纯化出的chil-2-6his蛋白作为抗原，包被elisa板用于抗体效价的检测，westernblot分析抗体特异性。结果表明：应用纯化的chil-2-intein融合蛋白成功制备特异性chil-2抗体，效价高达4096000，且该抗体也能用于intein标签蛋白的检测。