农杆菌介导类胡萝卜素合成酶基因lycb转化菊花的研究

？以菊花愈伤组织为转化受体，通过农杆菌介导法，利用番茄红素β-环化酶基因(lycb)对菊花进行转化，以抗性愈伤率为指标，探讨了侵染时间、共培养时间、农杆菌菌液浓度、乙酰丁香酮(as)浓度等因素对转化的影响，建立了lycb基因转化菊花的遗传转化体系。结果表明:农杆菌侵染菊花愈伤组织的最佳时间为5min；农杆菌菌液浓度od600值0.55；愈伤组织与农杆菌共培养的时间以3d效果最好；添加as可提高抗性愈伤率，适宜的as浓度为100μmol/l；采用hyg浓度由低到高的筛选方式可有效提高抗性愈伤率；pcr分子检测初步证明目的基因lycb已转入菊花愈伤组织中。