一种简便高效的人胚胎干细胞转染方法

目的:利用fugene6基因转染试剂建立一种简便高效的人胚胎干细胞转染方法,并建立稳定表达增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,egfp)报告基因的人胚胎干细胞系,为人胚胎干细胞研究提供一个非常有用的细胞模型。方法:通过fugene6基因转染试剂成功地将egfp基因转入无饲养层培养的人胚胎干细胞中,嘌呤霉素筛选得到稳定表达egfp的克隆;利用倒置荧光显微镜和流式细胞仪检测egfp在人胚胎干细胞中的表达情况。结果:egfp瞬时转染效率为30%～40%,稳定转染效率约1/104～5,且稳定转染的人胚胎干细胞均表达egfp。结论:fugene6是一种良好的基因转染试剂,它可以有效地将外源基因转入人胚胎干细胞中,为人胚胎干细胞的转基因研究提供新的实验手段。