人精子蛋白sp22的cdna克隆、表达及纯化分析

精子蛋白sp22与生殖功能密切相关。睾丸附睾毒物氯醇硝唑作用于大鼠生殖系统时,精子表面sp22大量脱落至附睾液中,导致生育力降低。深入研究发现sp22与生育力存在量的关系。从人睾丸组织中提取总rna,通过rt-pcr克隆出人睾丸组织中的sp22基因,连入pgemteasyvector进行cdna克隆测序。再亚克隆到pet-28a-c(+)vectors成功构建pet-28a-c(+)vectorssp22表达载体,并转化bl21(de3),以iptg诱导表达,对诱导剂浓度、诱导时间进行优化后以镍离子亲和层析纯化目的蛋白。蛋白表达量占菌体总蛋白30%。所得蛋白可推动sp22的蛋白结构活性、睾丸组织中的定位分布及在男性不育、癌症等疾病检测中的应用研究。