用杆状病毒-昆虫细胞系统表达、纯化重组的人源化氨基末端lbp

根据已有的资料显示lbp与lps的结合位点位于其氨基末端的第91～100个氨基酸残基。在体外构建含有人lbp与lps结合活性部分的穿梭质粒pbacmidtlbp,并且带上6×his的标签,用此穿梭质粒转染sf21昆虫细胞,获得重组病毒。然后用重组病毒液感染对数生长期的sf21昆虫细胞,72h后收获含有这种截断型人源化氨基末端lbp-(nh-lbp)的培养上清。用金属亲和树脂纯化后,采用sds-page电泳以及western-blot鉴定所得到的纯化物。成功获得相对分子质量约为30000的nh-lbp。为进一步研究lbp在介导lps活化靶细胞中的作用机制奠定了基础。