产生志贺样毒素的噬菌体φ297整合酶基因(int)的克隆和序列分析

目的:克隆并分析细菌性噬菌体φ297的整合酶基因(int)。方法:采用加接头的基因dna片断为模板进行步移pcr,根据溶源性噬菌体φ297的染色体dna上类似于噬菌体933w的整合酶基因的一个40个核苷酸设计引物,进行扩增、克隆、亚克隆、测序和序列分析。结果:得到了噬菌体φ297编码的整合酶基因(int)的完整序列,它的长度是1287bp,编码了428个氨基酸的int蛋白质。将它们的序列与λ噬菌体的整合酶家族其它成员进行了比较,发现噬菌体φ297的整合酶基因(int)与噬菌体vt1sakai的整合酶基因有79%的同源性,噬菌体φ297的int蛋白与噬菌体vt1sakai的int蛋白在氨基酸序列上有82%的同源性。n-末端的氨基酸区域是完全保守的,而中心区和c-末端则显示出较大差异。结论:噬菌体φ297与λ噬菌体的int基因来源于同一基因库,噬菌体φ297可能属于λ噬菌体家族。