生物信息学预测与实验验证相结合策略筛选鉴定新的人分泌蛋白基因

使用生物信息学预测结合实验验证的策略筛选鉴定人新的分泌蛋白基因。用signalp、sosui、psort和blast等程序对uniprot蛋白数据库进行生物信息学分析,筛选出用于实验验证的14个功能未知基因。采用rtpcr方法,克隆得到14个基因的全长编码序列,并构建到真核表达载体pcdna3.1(-)mychis质粒。采用蛋白质印迹与免疫荧光分析,检测到其中7个基因的表达。除其中一个在细胞核表达外,其余6个只在细胞质中表达;其中的4个基因的表达产物在细胞培养液中可被检测到,鉴定为4个新的分泌蛋白基因。