黄瓜花叶病毒2b蛋白c末端无抑制局部rna沉默的活性

目的:黄瓜花叶病毒(cucumbermosaicvirus,cmv)编码的2b蛋白具有rna沉默抑制子的功能,其c末端氨基酸序列非常保守。为了明确2b蛋白c末端保守序列在rna沉默抑制中的作用,构建了cmvq株系野生型2b及其c末端缺失突变体2bdelc的植物瞬时表达载体。通过农杆菌共渗滤法对野生型2b及其c末端突变体的沉默抑制子活性进行了分析。结果与结论:烟草接种叶片中野生型2b及其c末端突变体的westernblot检测表明,野生型2b蛋白与其c末端突变体在植物中积累水平变化不大,说明2b蛋白c末端氨基酸残基在维持2b蛋白在植物细胞中的稳定性方面无作用。在整株、细胞和分子水平上分别比较了野生型2b及其突变体2bdelc对共表达gfp的表达量影响,结果表明在所有的测定结果中二者均无明显地差异,说明2b蛋白c末端94-111位氨基酸在抑制局部rna沉默上无生物学活性,讨论推测c末端应不存在与小rna结合的结构域。