基因重组pacap27衍生多肽rp2制备及促角膜上皮细胞增殖研究

利用基因工程技术高效制备具有促进角膜上皮细胞增殖功能的垂体腺苷酸环化酶激活肽(pacap27)衍生多肽rp2,在细胞水平初步研究其生物学作用,为其用于角膜损伤治疗提供实验基础.采用基因重组技术表达重组肽rp2,经chitin-beads和hplc纯化、sds-page和质谱鉴定后,研究其对小鼠角膜上皮细胞增殖的影响.实验结果表明:利用基因重组技术制备的pacap27衍生多肽rp2的分子量为3.3kda,纯度达96%;分别用重组肽rp2、pacap27及pbs作用于小鼠角膜上皮细胞,处理24h及48h时,rp2处理组角膜上皮细胞增殖率分别为(49.6±3.1)%、(93.0±1.7)%,pacap27处理组细胞增殖率分别为(29.0±2.4)%、(78.8±2.6)%,pbs对照组细胞增殖率为(20.2±1.1)%,(40.9±3.3)%.利用建立的重组多肽制备技术条件,可实现pacap衍生多肽rp2高效制备,制备的rp2可有效促进角膜上皮细胞的增殖,从而有望成为一种新型角膜损伤治疗候选药物.