基因工程菌pseudomonassp.b4的构建及其产邻苯二酚发酵条件的初步研究

利用pcr技术以pseudomonassp.b3-1基因组dna为模板，扩增出2.9kb编码苯甲酸双加氧酶基因簇benabc。将该基因簇连接于plafrj载体，电转化至e．colidh5α，再通过三亲本结合法导入野生菌株pseudomonassp.b3-1中，得到了一株邻苯二酚产量提高的基因工程菌，命名为pseudomonassp.b4。发酵条件优化表明，当苯甲酸钠浓度为6.0g/l，聚蛋白胨浓度为2.0g/l，温度为32℃以及ph值为6.0时，工程菌在200rpm旋转摇床发酵36小时后，邻苯二酚产量达到0.7mg/ml，比优化前提高了20％。