凝血酶抑制剂tti的表达及性质研究

将来源于采采蝇的tti基因序列改造成大肠杆菌偏爱密码子，利用重组pcr方法获得tti目的基因片段，在大肠杆菌中得到高效表达。经纯化获得了纯度高于98%的融合蛋白，建立了酶活测定方法。实验证明融合蛋白具有抑制凝血酶的活性。当凝血酶浓度为10u/ml，纯化的融合tti体积为10l，底物浓度为250mol/l，融合蛋白对凝血酶的抑制率为73%，确定反应类型为竞争性抑制，ki为35mol/l。