重组毕赤酵母发酵牛肉风味肽的中试研究

研究分泌表达16拷贝牛肉风味肽（beefymeatypeptide,bmp）毕赤酵母工程菌株(pichiapastorisgs115-16b2)的500l发酵罐中试发酵工艺。在500l发酵罐中采用三步发酵法进行了3批次中试发酵实验，设定菌体培养阶段温度为30℃，ph5.0，诱导表达阶段温度为28℃，ph3.0。在发酵程中通过调节搅拌速度、通气量和罐压等措施来使do维持在20%~35%左右，总共发酵126h（诱导时间为96h），当诱导88h后（发酵118h），600nm波长下的光密度值(od600)达到184.5，菌体湿重达到318.7g/l，目的产物bmp的表达量达到最高为172mg/l，实现了bmp的高效表达。通过中试发酵初步建立了工程菌p.pastorisgs115-16b2的中试发酵工艺，为bmp的进一步研究开发奠定了良好基础。