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中国生物工程杂志 2008
bacillusstearothermophilusiam11001l-阿拉伯糖异构酶在大肠杆菌中的表达、纯化及活性研究Keywords: l-阿拉伯糖异构酶,d-塔格糖,基因重组,亲和层析 Abstract: l-阿拉伯糖异构酶是生物法生产新型功能性因子d-塔格糖最为有效的酶。本文获得了一种新型耐热l-阿拉伯糖异构酶的编码基因araa,来源于bacillusstearothermophilisiam11001,经ncbiblastn分析,与genbank中thermussp.im6501araa序列的同源性为95%,并将该新基因提交到genbank,获得登陆号:eu394214。以pet-22b(+)为载体质粒,e.colibl21(de3)为宿主细胞,构建了基因重组菌,iptg可诱导目的蛋白的过量表达;经亲和层析纯化的重组蛋白样品进行sds-page电泳分析,约在59kda处出现显著的特征蛋白条带;同时对重组l-ai的活性进行了初步研究,全细胞反应24小时d-塔格糖的转化率为39.8%。
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