雅致放射毛霉as3.2778碱性蛋白酶的纯化及性质研究

利用盐析，离子交换，疏水层析及凝胶过滤的方法从雅致放射毛霉as3.2778的发酵麸曲中分离纯化出一碱性蛋白酶，其纯化提高了22.7倍，酶活回收率16.1%，最终比酶活可达到6094u/mg。电泳分析发现，该蛋白酶是一单体蛋白，其分子量大约在32kda。性质分析表明：该蛋白酶在60℃、ph8.5～10.5具有最大催化活性；在40℃以下，ph6.0～9.0的范围有很好的稳定性；1mm的pmsf可以完全抑制其活性，显示该蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶家族。底物专一性的研究发现，该蛋白酶有相当广泛的肽键选择性，对绝大多数由疏水性氨基酸（尤其是亮氨酸）构成的肽键有很强的水解能力。