中国明对虾过氧化物还原酶基因在大肠杆菌中的重组表达、产物纯化及活性测定

过氧化物还原酶（prx）是生物体内广泛存在的一类酶，在消除过氧化氢和抗氧化胁迫中起着重要的作用。本研究采用pcr扩增编码中国明对虾prx成熟肽的基因，并克隆到大肠杆菌表达载体pcr？t7/nttopo？ta中进行体外重组表达。重组质粒转化大肠杆菌bl21(de3)plyss后，经iptg诱导表达产生包涵体形式的目的蛋白。对重组蛋白进行lc–esi–ms分析，结果表明融合蛋白的四个肽段与中国明对虾prx相应肽段完全一致。将重组蛋白通过金属螯合柱进行纯化，进而透析、复性，最后获得了具有较高过氧化物酶活性的重组prx。中国明对虾prx的成功表达，为深入研究其在中国明对虾免疫反应和抗氧化胁迫中的作用奠定了基础。