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中国生物工程杂志 2008
猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白nsp2的原核表达及其单克隆抗体的研制Keywords: 猪繁殖与呼吸综合征病毒,单克隆抗体,原核表达 Abstract: 将猪繁殖与呼吸综合征病毒(prrsv)s1株nsp2蛋白基因进行截短修饰(tnsp2),克隆于pgex-6p-1载体,转化大肠杆菌后用iptg诱导表达。western-blot结果表明,融合表达的gst-tnsp2蛋白能被prrsv阳性血清特异性识别,大小约50kd。经gst柱提取纯化蛋白gst-tnsp2,免疫balb/c小鼠,取脾细胞与sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,获得2株能稳定分泌抗nsp2蛋白抗体的杂交瘤细胞株,将其命名为2b5、3h3。亚型鉴定结果均为igg1型,其轻链均为κ链。间接免疫荧光试验证明,2b5和3h3均能与prrsvs1毒株产生特异性反应,而不能与sy0608毒株反应。从而为prrsv分离株的鉴定及nsp2功能研究奠定了重要基础。
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