美洲商陆抗病毒蛋白缺失型基因pap-c23在大肠杆菌中的表达

从成熟的美洲商陆抗病毒蛋白pap中克隆了c端缺失23个氨基酸的基因pap-c23，以pet101为表达载体构建了重组质粒，转化入大肠杆菌bl21(de3)，iptg诱导表达。sds-page分析结果表明，目的蛋白在bl21(de3)中获得表达，表达产物以不溶的包涵体形式存在。通过对表达条件的优化，重组蛋白的表达量可占总包涵体蛋白的29.6%。切胶回收表达的重组蛋白，冰浴研磨后用pbs溶解，再加入等体积福氏不完全佐剂，免疫家兔，制备抗pap蛋白的多克隆抗体。间接elisa法测定所得抗血清效价为1：1000，westernblot分析结果显示，该抗血清与表达的重组蛋白和天然的pap蛋白均发生特异性的免疫反应，说明pap-c23基因在大肠杆菌中得到了正确表达，且重组蛋白的免疫原性较好。