抗克伦特罗单克隆抗体的制备及鉴定

利用重氮化法，将小分子半抗原克伦特罗(cl)与牛血清白蛋白(bsa)偶联，制备得到cl-bsa完全抗原，并用其免疫balb/c小鼠，通过细胞融合、连续克隆筛选能稳定分泌高特异性抗cl的单克隆抗体细胞株。结果显示：使用偶联率为17的克伦特罗完全抗原免疫balb/c鼠，间接elisa法检测其中三只小鼠血清效价较高；细胞融合检测得到其融合率为85.26%，阳性率为15.23%；经四次连续克隆得到了一株特异性最佳的细胞株4h5，间接elisa法检测其培养上清的od450nm达到1.265±0.060,与bsa交叉反应od450nm仅为0.060±0.006,腹水效价达3.2×106；最后经鉴定确定该单克隆抗体亚型为igg1，轻链为κ。