dinh与sc3d3融合基因真核表达质粒的构建及表达

目的:构建dinh和sc3d3融合分泌型真核表达载体,并在bhk-21细胞中表达。方法:采用rt-pcr技术扩增绵羊补体c3d基因片段，将该片段插入到pmd18-t载体，然后亚克隆至真核表达载体pcdna-dppis-dinh-mc3d3构建pcdna-dppis-dinh-sc3d3。pcdna-dppis-dinh-sc3d3脂质体法转染bhk-21细胞,westernblotting鉴定dinh-sc3d3融合蛋白。结果:酶切及测序结果显示,pcdna-dppis-dinh-sc3d3构建正确;在bhk-21细胞中成功地获得了dinh-sc3d3融合蛋白的高效表达。结论:本实验构建的抑制素基因疫苗可在真核细胞内正确表达，这为进一步的动物实验打下了基础。