褐黄孢链霉菌基因组dna的提取及rapd体系的优化

以改进的sds法提取褐黄孢链霉菌基因组dna，对其进行随机扩增多态性（rapd）研究。通过单因素和正交试验相结合的方法，建立了适于褐黄孢链霉菌rapd分析的pcr反应体系：包括taq聚合酶、mg2+、随机引物、dntps和模板浓度。在20μl体系中，模板dna浓度60-150ng，taq聚合酶为1.0-1.5u，引物浓度0.3-0.4mmol/l，dntps浓度200-250μmol/l，mg2+浓度2.5-3.0mmol/l。在此反应体系下可扩增出条带数目多且清晰稳定的电泳图谱。