line-1编码蛋白l1-orf1的原核表达纯化和多克隆抗体制备

目的:制备具有肿瘤组织特异性表达的l1-orf1蛋白多克隆抗体并进行初步应用研究。方法:采取基因工程表达方法制备l1-orf1蛋白,免疫家兔制备多克隆抗体,间接elisa检测抗体效价,westernblot和细胞免疫荧光方法检测抗体特异性,免疫检测验证其识别肿瘤细胞内l1-orf1蛋白的特异性。结果:制备的抗l1-orf1蛋白多克隆抗体具有很高的敏感性与特异性,免疫学检测表明该抗体不仅能检测出正常细胞中瞬时表达的l1-orf1蛋白,而且可检测出肿瘤细胞中天然表达的l1-orf1蛋白。结论:制备的多克隆抗体具有较高的敏感性与特异性,为以后该抗体的进一步应用奠定了基础。