vmip-ⅱn端重组肽的表达纯化及活性鉴定

病毒巨噬细胞炎症蛋白-ⅱ(viralmacrophageinflammatoryprotein-ⅱ,vmip-ⅱ)由卡波西肉瘤疱疹病毒编码，前期研究证明了vmip-iin端21肽(nt21mp)选择性的阻断趋化因子cxcr4，从而抑制乳腺癌细胞趋化的活性。通过化学合成法获得编码vmip-ⅱn末端的基因序列，与pgex-kg（克隆位点的n端有谷胱甘肽转移酶gst标签序列）连接构建原核表达载体，重组质粒在大肠杆菌e.colibl21(de3)中获得表达，免疫印迹显示重组蛋白gst-nt21mp主要在细菌裂解液上清中表达，可溶性部分经亲和层析、超滤、快速蛋白液相色谱（fastproteinliquidchromatography,fplc）纯化获得高纯度的gst-nt21mp蛋白。利用transwell趋化试验测定gst-nt21mp的活性。结果显示，重组蛋白gst-nt21mp能够抑制乳腺癌细胞sk-br-3的趋化活性，可作为治疗乳腺癌转移的潜在性靶向药物。