19-去甲睾酮异源性cielisa试剂盒的研制及应用

筛选抗19-去甲睾酮（nt）单克隆抗体，建立异源性cielisa试剂盒。用人工抗原nt-17-bsa免疫balb/c小鼠，细胞融合技术建立1株抗nt单克隆杂交留细胞nt1-b7，同种型为igg1/k，腹水效价达0.64×105，亲和常数（ka）为4.31×109l/mol，半数抑制浓度（ic50）为0.55ng/ml，与群勃龙和雌二醇的交叉反应率（cr）分别为2.2%和1.6%，与其它化合物无cr。异源性cielisa试剂盒在猪肉、猪尿、牛肉和牛尿四种基质中的检测限分别为0.24、0.23、0.22和0.17ng/ml，批内和批间相对标准差（rsd）在4.4％～21.8％，添加回收率在85％～110％，4℃下保存期至少6个月。nt-kit的基质ph值适用范围为6.5～7.5，温育过程优化后可节约检测时间30～90min。试剂盒灵敏度高、特异性强，可应用于样品基质中nt残留检测。