原核表达人mmp-2pex片段对乳腺癌细胞bicr-h1的生长及转移的抑制

目的:克隆表达人源基质金属蛋白酶-2(mmp-2)的c－端类血红素结合域片段pex,在鸡胚脲囊膜模型上研究pex对血管发生,乳腺癌bicr-h1的生长及转移抑制作用。方法:构建人源pex的原核表达载体pet-28a(+)-pex-his,转化大肠杆菌bl21de3-plys,异丙基β-d硫代半乳糖苷(iptg)诱导pex蛋白;包涵体蛋白经尿素变性后,通过ni-nta琼脂糖鏊合柱纯化、复性蛋白;观察其对人脐静脉血管内皮细胞增殖和鸡胚脲囊膜血管生长的影响;用带有绿色荧光蛋白(gfp)的腺病毒感染高转移人乳腺癌细胞bicr-h1,接种细胞到10日鸡胚脲囊膜上致瘤,通过静脉注射不同剂量pex后,观察瘤重、体积和肺转移。结果:5~30μg经原核表达纯化的人pex蛋白能有效抑制人脐静脉血管内皮细胞增殖能力,表现为时间和剂量依赖效应,并可抑制鸡胚脲囊膜血管发生。bicr-h1的生长及转移在10μgpex作用时可得到有效抑制,30μg时则完全抑制,未见有肿瘤在接种部位的形成,更未观察到肺脏的转移灶。结论:原核表达纯化的人源pex具有抑制血管生成、进而抑制乳腺癌bicr-h1细胞的生长和转移作用,是潜在的抗血管发生治疗肿瘤药物,有进一步研发价值。