辛德毕斯病毒e2包膜蛋白可溶性表达条件的优化

目的:通过优化表达条件,提高辛德毕斯病毒e2包膜蛋白胞外区的可溶性表达量。方法:构建含e2基因胞外区的重组表达质粒pgex-6p-1-e2,筛选合适宿主菌和诱导温度,并构建5种分子伴侣共表达系统(即pg-kje8、pgro7、pkje7、pg-tf2和ptf165种分子伴侣质粒分别与重组表达质粒pgex-6p-1-e2共表达),筛选最适分子伴侣质粒。结果:(1)e2蛋白的表达量在e.colibl21、bl21(de3)plyss、rosetta(de3)及origamib(de3)4种表达菌中没有明显差别;(2)16℃诱导时e2蛋白在上清中可溶性表达量最高;(3)分子伴侣质粒pg-tf2使目的蛋白的可溶性表达量提高了15.7%,作用最为显著。结论:通过优化表达条件及使用分子伴侣共表达系统提高了e2蛋白的可溶性表达,为进一步e2蛋白的相关研究奠定了基础。