脑心肌炎病毒(emcv)的内部核糖体进入位点活性的研究

脑心肌炎病毒(encephalomyocarditisvirus,emcv)的内部核糖体进入位点(internalribosomalentrysite,ires)已被广泛运用于蛋白的表达中,如应用于clontech公司推出的pires2质粒对增强型绿色荧光蛋白(egfp)的表达。但是由于对emcv的ires了解还不够深入而在利用emcv的ires进行基因表达过程中经常会遇到问题,很有必要对其进行更深入的研究。以红绿色荧光蛋白基因作为报告基因,通过分子克隆、荧光显微镜、荧光分光光度计、westernblot等分子细胞生物学手段,对emcv的ires末端序列与其活性的关系进行了深入研究。研究发现emcv的ires末端序列对其ires的活性影响极大,而人们常用的报告基因egfp本身也可能存在ires。