甲基营养菌methylobacteriumsp.mb200中部分一碳代谢相关基因的定位及mtda和mtdb基因的克隆研究

以甲基营养细菌methylobacteriumsp.mb200为出发菌株,首先利用质粒转座子(ptnmod-rkm’)构建了目的菌株mb200的部分突变体库,获得能够在双抗性mmii板上生长的突变体共11552株,然后在双抗性mmi板上复筛获得不能够利用甲醇的突变体333株(初步认为是一碳代谢途径被破坏的突变株),为一碳代谢相关基因的克隆研究奠定了基础。随后利用tail-pcr技术快速准确地从突变体库中定位了部分与一碳代谢相关的基因,并根据ptnmod-rkm’具有复制起始位点能够快速克隆插入位点侧翼序列的特性克隆到mtda和mtdb基因的全序列并进行了初步分析。