重组阿拉伯糖苷酶在毕赤酵母中的分泌表达及其活性分析

假密环菌是一种果树腐病菌，具有较强的分解代谢纤维素的能力。本文根据已克隆出的阿拉伯糖苷酶基因序列（accessionnumberaj620046）设计引物从假密环菌的mrna中克隆出阿拉伯糖苷酶的orf片段，构建重组质粒ppic9-af，与组氨酸标签融合，电转化毕赤酵母菌gs115并进行诱导表达。所得到的重组阿拉伯糖苷酶在30-35℃时有较高的酶活，最适反应活性ph值在6.0-8.0之间，而在ph4.0－8.0范围内酶活基本保持在80%以上，比大多已报道的阿拉伯糖苷酶最适ph范围宽。本研究工作对于高效表达重组阿拉伯糖苷酶以及对其进一步的酶学性质研究提供了一个良好的基础。